Framåt och bakåt primrar är kovalent fästa vid hög densitet till objektglaset i en flödescell. Förhållandet mellan primrarna och mallen på bäraren definierar yttätheten hos de förstärkta klusterna. Flödescellen exponeras för reagens för polymerasbaserad förlängning, och grundning sker som den fria / distala änden av ett ligerat fragment "broar" till en komplementär oligo på ytan. Upprepad denaturering och förlängning resulterar i lokaliserad amplifiering av DNA fragment på miljoner separata platser över flödescellytan. Fastfasförstärkning producerar 100–200 miljoner rumsligt separerade mallkluster, vilket ger fria ändar till vilka en universal sekvenseringsprimer hybridiseras för att initiera sekvenseringsreaktionen. Denna teknik lämnades in för ett patent 1997 från Glaxo-Welcome's Geneva Biomedical Research Institute (GBRI), av Pascal Mayer, Eric Kawashima och Laurent Farinelli, och presenterades för första gången 1998. Adams och Kron publicerade 1994 en patent på en liknande, men icke-klonal, ytförstärkningsoperation, benämnd "bridge amplification" anpassad för klonal amplifiering 1997 av Church and Mitra.
Bild 155A | PacBio SMRT-teknik och Oxford Nanopore kan använda oförändrade DNA för att möta metylering. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) från Wikimedia Commons
Författare : Yavor Mendel
Kommentarer
Skicka en kommentar