En av de mest grundläggande teknikerna inom molekylärbiologi för att studera proteintjänst är molekylkloning. I denna teknik DNA klonas som kodar för ett protein av intresse med användning av polymeraskedjereaktion( PCR) och / eller begränsande enzymer till en plasmid (expressionsvektor). En vektor har tre särdrag: ett replikationsursprung, ett multipelkloningsställe( MCS) och en selektiv markör som vanligtvis är antibiotikaresistens. Ligger uppströms om det flera kloningsstället finns promotorregionerna och kopieringsstartstället som reglerar formen för expression av klonad gen. Denna plasmid kan införas i antingen bakterieceller eller djurceller. Introduktion av DNA i bakterieceller kan göras genom transformation via upptag av naken DNA, conjugation via cellcellskontakt eller genom transduktion via viral vektor. Att införa DNA i eukaryota celler, som visas av djurceller, med fysiska eller kemiska medel kallas transfection. Flera tekniker som inte är likadana transfection är tillgängliga, såsom visas med kalciumfosfat transfection, elektroporering, mikroinjektion och liposom transfection. Plasmiden kan integreras i genomet, vilket resulterar i en stabil transfection eller kan förbli oberoende av genomet, kallad transient transfection .
Bild 095A | Schematisk relation mellan biokemi, genetik och molekylärbiologi | Det finns ingen maskinläsbar författare. OldakQuill antog (baserat på upphovsrättsanspråk). (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Schematic_relationship_between_biochemistry,_genetics_and_molecular_biology.svg), "Schematiskt samband mellan biokemi, genetik och molekylärbiologi", https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/ juridisk kod från Wikimedia Commons
Författare : John Kaisermann
Kommentarer
Skicka en kommentar